相差顯微鏡較普通顯微鏡增加的結構
相位差顯微鏡 (Phase Contrast Microscope):
1.相位差顯微鏡的結構:
相位差顯微鏡,是應用相位差法的顯微鏡。因此,比通常的顯微鏡要增加下列附件:
(a).裝有相位板(相位環形板)的物鏡,相位差物鏡。
(b).附有相位環(環形縫板)的聚光鏡,相位差聚光鏡。
(c).單色濾光鏡-(綠)。
2.功能說明如下:
(a).相位板使直接光的相位移動90°,并且吸收減弱光的強度,工具顯微鏡,在物鏡后焦平面的適當位置裝置相位板,相位板必須確保亮度,為使衍射光的影響少一些,相位板做成環形狀。
(b).相位環(環狀光圈)是根據每種物鏡的倍率,而有大小不同,可用轉盤器更換。
(c).單色濾光鏡係用中心波長546nm(毫微米)的綠色濾光鏡。通常是用單色濾光鏡入觀察。相位板用特定的波長,移動90°看直接光的相位。當需要特定波長時,必須選擇適當的濾光鏡,濾光鏡插入后對比度就提高。此外,相位環形縫的中心,必須調整到正確方位后方能操作,對中望遠鏡就是起這個作用部件。
大部分的細胞在顯微鏡下呈透明的,故需染色
使用時注意事項:
使用時,較重要的注意事項為下列三點:
(a).執行正確的操作方法。
正確操作的較重要事項必須正確地調整好相位環的中心。
(b).根據標本的要求,選擇合適的相位差物鏡。
(c).用其他觀察方法作比較,對標本作出正確的判斷。
解像力 原理
裸眼 100μm 人類的眼睛可以看清物體的范圍,有一定的距離,其范圍兩端分別稱為眼的遠點和近點。 眼睛的近點隨著年齡而異,通常正常人的明視距離約為25公分,如物體移到近點內,則顯得模煳不清楚。
光學顯微鏡Optical Microscope 0.2μm
(1).解像力有先天的限制,因此無法看到小于小細菌細胞之直徑以下的細部構造。
(2).由于大部分的細胞在顯微鏡下呈透明的,故需染色。
(3).增加光學顯微鏡影像的明暗對比的方法很多,例如利用染色法處理樣本,或在顯微鏡上附加特殊裝置例如位相差顯微鏡、暗視野顯微鏡、干涉顯微鏡、偏光顯微鏡、X光顯微鏡、螢光顯微鏡、紫外光顯微鏡 等。
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