單元名稱(chēng)
顯微鏡的操作與凋亡細(xì)胞的觀察
實(shí)驗(yàn)/實(shí)習(xí)目的
人體內(nèi)的細(xì)胞終究是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡則是病理
性的,有關(guān)細(xì)胞死亡過(guò)程的研究,近年來(lái)已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究的一個(gè)熱
點(diǎn),目前人們已經(jīng)知道細(xì)胞的死亡起碼有兩種方式,即細(xì)胞壞死與細(xì)胞凋亡。
細(xì)胞壞死是早已被認(rèn)識(shí)到的一種偶發(fā)性的細(xì)胞死亡(Accidental cell death)細(xì)胞
死亡方式,伴隨著死亡細(xì)胞會(huì)有腫脹、大水泡(Blebbing)與引發(fā)發(fā)炎反應(yīng)的現(xiàn)
象,而細(xì)胞凋亡則是近年逐漸被認(rèn)識(shí)的一種細(xì)胞死亡方式,凋亡細(xì)胞特徵性的
形態(tài)學(xué)改變會(huì)有胞膜皺縮內(nèi)陷,水泡出芽(Budding)現(xiàn)象,較后分割胞質(zhì),形成
具有完整膜結(jié)構(gòu)、內(nèi)含細(xì)胞器和/或核碎片的凋亡小體(apotosis body),無(wú)局
部炎癥反應(yīng)。這些細(xì)胞形態(tài)上的差異可以利用倒立式相位差顯微鏡,配備超長(zhǎng)
工作距離聚光鏡,以及長(zhǎng)工作距離物鏡,可直接觀察各種培養(yǎng)容器內(nèi)的細(xì)胞形
態(tài),或者製成染色玻片檢體,以明視野光學(xué)顯微鏡觀察。
實(shí)驗(yàn)/實(shí)習(xí)原理
要以普通生物鏡來(lái)觀察有無(wú)色透明構(gòu)造的標(biāo)本或活體標(biāo)本,若標(biāo)本不經(jīng)染
色則觀察上會(huì)有所困難,相位差顯微鏡就是因應(yīng)要觀察這樣的標(biāo)本而生,因?yàn)?/P>
標(biāo)本可不經(jīng)染色,所以標(biāo)本的準(zhǔn)備及觀察程序上能更快速達(dá)成,相位差顯微鏡
除了有普通生物顯微鏡所有的機(jī)構(gòu)配備外,另外裝有相位差板及相位差專(zhuān)用物
鏡;相位差板裝于標(biāo)本載物移動(dòng)臺(tái)的下方取代普通光圈聚光鏡,相位差專(zhuān)用物
鏡則取代普通物鏡裝設(shè),通過(guò)這些相位差機(jī)構(gòu)及標(biāo)本的光線分為直進(jìn)光及回折
光,兩種光線互相干涉(具有相位差)產(chǎn)生明暗差而行觀察,因此運(yùn)用于活體標(biāo)
本的微細(xì)構(gòu)造觀察較適合。
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