直接細胞計數或測量細胞光度測定分析顯微鏡
光度測定法
光度測定法用于測定促進生長的和抑制生長的物質。測定促進生
長的物質的實例
雖然此處介紹的測定實例利用青霉素G的測定作為一個樣板,但是
,此法很容易加以改變,用于其他抗生素的測定.對金黃色葡萄球菌
有抑制活性的大多數物質,都可以通過改變標準品及其濃度范圍,在
青霉素系統中進行測定。表2-7中的數據,正是通過改變活性物質的青
霉素系統酌——種變化而獲得的。正如前面討論過的那樣,如果緩沖
液和培養基的pH發生改變,大多數抗生素的濃度范圍也將不同
對革蘭氏陰性菌有抑制活性的抗生素,通常應該藉助一種革蘭氏
陰性菌進行測定
因為對大量樣品而言,比濁測定法比直接細胞計數或測量細胞的
干重更為方便,所以,細胞增殖作為一種測定反應,常常根據比濁法
測量的一些形式來進行定量測定。
比濁度的最簡單的形式是終點試驗,其反應以全或無的形式記錄
下來。這就是在血清學中廣泛應用的系列稀釋試驗。此法是早期抗生
素研究工作中應用的一種試驗。在分離步驟基本上是全或無的情況下
,如同在很多溶劑抽提步驟中那樣,系列稀釋試驗是可以滿足要求的
。
在小試管中的幾種不同稀釋度的抗細菌物質,接種入測定·菌,
保溫培養。能夠明顯地引起測定菌生長的完全抑制的抗細菌物質的最
低抑制濃度,被定義為最低抑制濃度。該化合物的活·性, 由最低
抑制濃度進行計算,可以用毫克/毫升的物質表示。對于很多方面的
目的而言,由此得到的結果與由更為費力的平板法!或比濁測定法得出
的結果一樣有用。
簡單的雙重系列稀釋法得出稀釋度的一個幾何級數,它的結·果
在所報道的濃度和其一半的濃度之間。根據推測,結果可以是上述二
濃度之間的任何數值。因此,系列稀釋法具有很大的、固有的易變性
,不適宜進行精確的定量測定。